目前市場(chǎng)上的ELISA試劑盒質(zhì)量參差不齊，如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要，主要參考以下四個(gè)因素：
一、檢測(cè)方式
如今檢測(cè)ELISA試劑盒有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)具有特征性的顏色，可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA結(jié)果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè)、熒光檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等。
二、實(shí)驗(yàn)類型
雖然有多種類型，不過它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。in-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)elispot是兩種特殊的類型，in-cell Elisa需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè)。elispot有點(diǎn)像蛋白印跡western blot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原形成斑點(diǎn)。此外，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是48孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗(yàn)。
三、抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于Elisa檢測(cè)，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如，對(duì)于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測(cè)有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測(cè)擁有特定抗原表位的抗原。
四、交叉反應(yīng)
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。盡管現(xiàn)在購買源自zhi定動(dòng)物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗，來避免上述問題。
以上是選擇ELISA試劑盒應(yīng)考慮這四個(gè)因素你了解了嗎？上海酶聯(lián)生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)營生物科學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)儀器、研究試劑和實(shí)驗(yàn)室耗材，致力于向國內(nèi)外生物科學(xué)研究人員提供服務(wù)。專業(yè)生產(chǎn)廠家具有先進(jìn)水平的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開發(fā)，推出了一系列具有競(jìng)爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視，更多地側(cè)重于的投入。
在線咨詢